利用CRISPR基因编辑技术敲除乙肝病毒基因

CRISPR基因组编辑技术，被业内称为能改造基因的“基因剪刀”，是当下最具革命突破性的生物技术之一。借助该技术，许多科学家正试图探究如镰状细胞性贫血、糖尿病、囊性纤维化、艾滋病和抑郁症等各种疾病的基因根源，以图找出新的标靶药物。该项技术也应用于改造酵母来生产生物燃料和改造小麦以抵抗害虫和干旱天气。

CRISPR技术于2012年问世，三位CRISPR技术先驱Jennifer Doudna、Emmanuelle Charpentier、麻省理工的张锋已分别创立了公司，正拓展CRISPR技术的基因编辑疗法在视网膜疾病、囊肿性纤维化、失明、血液病及先天性心脏病等方面的商业化应用。

CRISPR技术被发明出来后，拥有30多年分子生物学及癌症研究经验的郭延德非常兴奋，他用两个月的实验时间，就成功利用该技术敲掉了一些癌细胞的突变基因。之后，郭延德将CRISPR基因编辑疗法瞄准了乙型肝炎病毒，他希望利用被称为“基因剪刀”的CRISPR技术来敲除掉患者体细胞内的乙肝病毒基因，研发出相应的CRISPR药物，来达到根治乙肝的效果。

“中国的乙型肝炎病毒（HBV）感染人数庞大，据卫计委2013年统计，中国有近1亿人是慢性HBV携带者，每年HBV的新发感染者达10万之多。”新创康达基因的创始人郭延德称，“目前，还没有根治乙型肝炎的方法，临床上主要是用干扰素类的药物来抑制乙型肝炎病毒，但却不能完全清除它。一旦停止药物治疗，患者肝脏中的HBV会重新活化。此外，患者长期用药易产生对治疗药物的耐受，以及药物会产生较大毒副作用，并能破坏患者的心脑血管系统甚至产生肝脏衰竭现象。”

药物控制治疗的诸多局限性，使得近几年兴起的基因治疗技术正逐渐被推广。目前，乙型肝炎的基因治疗手段主要包括基于RNAi、基因产物(蛋白质)及造血干细胞的基因治疗等。不过，这些基因治疗的临床效果虽已被证实，但在技术和应用上仍然存在一些亟待解决的问题，包括治疗专一性及高效问题、以及基因治疗费高昂等。CRISPR技术具有彻底破坏病毒复制、预防病毒感染、对机体毒副作用小、费用低廉等优点，因此这种新型治疗手段已成为医疗科研工作者的研究热点。

36氪此前报道过，四川大学华西医院的肿瘤学家卢铀领导的团队计划于今年8月在肺癌患者身上使用此项基因编辑技术，来治疗肺癌。据悉，这是世界首个在人体上的CRISPR–Cas9基因编辑试验。目前，国际上还没有相关的CRISPR药物被研发出来。

“我们认为基因编辑技术可以用来彻底根除乙型肝炎。为此，我们在细胞水平和分子水平做了一系列实验，研制了分子镖，它能摧毁各种病毒的基因复制酶而保全正常细胞，结果表明基因编辑技术可以彻底清除细胞内的乙肝病毒。此外，我们对CRISPR-CAS9系统进行了革新，发明了多目标攻击法，这大大地提高了攻击靶标病毒基因的精确性和效率。当前国内相关专利正在申请中。”郭延德称。

“现在，我们计划在人类肝嵌合小鼠模型中测试这一方法，以评估和优化传递方法和给药方法，预计在一年内完成动物实验；此后可以开展临床试验，完成I-4期的临床实验之后，会进行CRISPR相关的药品申报。”

目前，新创康达基因公司还在注册中，并且已和北京生命科学园的公司及有关单位在洽谈实验室合作事宜。公司的核心技术团队有4人。创始人郭延德毕业于美国南卡大学生物化学系，获分子生物学博士学位。自1985年以来, 一直从事分子生物药研究。其是美国济生医药研究所创办人，自2006年该研究所成立以来，一直出任董事长，主持研制基因工程产品；张文亮毕业于中国农业大学，获生物化学博士学位。自2007年以来，一直在美国从事基因敲除研究工作，于2014年12月加入GEOSON医药研究所。雷耀辉博士毕业于加拿大蒙特利尔大学，获博士学位。自2008年以来, 一直从事药物研发和生产。

新创康达基因正在寻求天使轮融资，融资金额将用于组建实验室，购买实验室设备、试剂耗材、及招募人才等。